3M Petrifilm™ E. coli/Coliform Count Plates Istruzioni per l'uso

E. coli / Coliform Count Plate

Test pour la numération des E.coli et Coliformes

E. coli und Coliforme Zählplatte

Piastra per il conteggio di E. coli e Coliformi

Placa para recuento de E.coli y Coliformes

E. coli / Coliform Telplaat

Odlingsplatta för E. coli och koliforma bakterier

E. coli / Coliform Tælleplade

for E. coli- / koliforme bakterier

E. colin ja koliformien kasvatusalusta

Placa para Contagem de E. coli / Coliformes

Πλακίδιο Καταμέτρησης E. coli / Κολοβακτηριδίων

Płytka do oznaczania liczby E. coli / Coliform

Тест-пластина для подсчета E. coli и колиформных бактерий

E. coli / Koliform Sayım Plakası

E.coli

および大腸菌群数測定用プレート（ＥＣプレート）

大肠杆菌

/大肠菌群测试片

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6404/6414/6444

Product Instructions

EC

E. coli / Coliform Count

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1

IT

Data di pubblicazione: 2015-08

Istruzioni del prodotto

Piastra per il conteggio di E. coli e Coliformi

Descrizione del Prodotto e uso Previsto

La Piastra 3M™ Petrilm™ per il conteggio di E. coli e Coliformi (EC) è un sistema con terreno di coltura pronto per l'uso

che contiene nutrienti Violet Red Bile (VRB) modicati, una sostanza gelicante solubile in acqua fredda, un indicatore

dell’attività glucuronidasi, 5-bromo-4-cloro-3-indolil-D-glucuronide (BCIG) e un indicatore al tetrazolio atto a facilitare

il conteggio delle colonie. Le Piastre 3M Petrilm EC sono usate per il conteggio di Escherichia coli (E. coli) e coliformi

nei settori alimentare e delle bevande. I componenti della Piastra 3M Petrilm EC sono decontaminati, seppure non

sterilizzati. Sicurezza alimentare 3M è certicata secondo ISO (International Standards Organization) 9001 per la

progettazione e la produzione. La Piastra 3M Petrilm EC non è stata valutata con tutti i prodotti alimentari, processi

alimentari, protocolli di test o tutti i ceppi di microrganismi possibili.

Sicurezza

L'utente è tenuto a leggere, comprendere e seguire tutte le informazioni di sicurezza contenute nelle istruzioni relative

alla Piastra 3M Petrilm EC. Conservare le istruzioni di sicurezza per poterle consultare in futuro.

AVVERTENZA: indica una situazione pericolosa che, se non evitata, potrebbe provocare la morte o lesioni gravi e/o

danni materiali.

W AVVERTENZA

Non utilizzare la piastra per il rilevamento di E. coli O157. Poiché la maggior parte dei ceppi di E. coli O157 sono atipici,

essi sono glucuronidasi negativi, non produrranno una colorazione blu e non saranno rilevati sulle Piastre 3M Petrilm EC.

Per ridurre i rischi associati all’esposizione a pericoli biologici e alla contaminazione ambientale:

• Seguire gli standard di settore e le normative locali vigenti per lo smaltimento dei riuti a rischio biologico.

Per ridurre i rischi associati al rilascio di un prodotto contaminato:

• Seguire tutte le istruzioni relative alla conservazione del prodotto contenute nelle istruzioni per l'uso.

• Non utilizzare dopo la data di scadenza.

Per ridurre i rischi associati all'infezione batterica e alla contaminazione del luogo di lavoro:

• Eseguire il test con la Piastra 3M Petrilm EC in un laboratorio adeguatamente equipaggiato, sotto la supervisione di

un microbiologo esperto.

• L'utente è tenuto ad addestrare il proprio personale nelle attuali tecniche di analisi appropriate: ad esempio, le buone

prassi di laboratorio

1

, ISO 17025

2

o ISO 7218

3

.

Per ridurre i rischi associati a un'interpretazione errata dei risultati:

• 3M non ha documentato l'uso delle Piastre 3M Petrilm EC nell'ambito di settori diversi da quello alimentare e delle

bevande. Ad esempio, 3M non ha documentato l'uso delle Piastre 3M Petrilm EC per analizzare acqua, sostanze

farmaceutiche o cosmetici.

• Non utilizzare le Piastre 3M Petrilm EC per la diagnosi di condizioni patologiche in esseri umani o animali.

• Le Piastre 3M Petrilm EC non dierenziano alcun ceppo di microrganismi dagli altri.

Per ulteriori informazioni, consultare la scheda di sicurezza.

Per qualsiasi domanda su applicazioni o procedure speciche, visitare il nostro sito Web all'indirizzo

www.3M.com/foodsafety o contattare il distributore o il rappresentante 3M di zona.

Responsabilitá Dell’Utente

Gli utenti sono tenuti a leggere e apprendere le istruzioni e le informazioni relative al prodotto. Visitare il nostro sito web

all’indirizzo www.3M.com/foodsafety, oppure contattare il distributore locale o rappresentante commerciale 3M per

ulteriori informazioni.

Nella scelta di un metodo di test, è importante tener conto del fatto che fattori esterni quali i metodi di campionamento, i

protocolli di test, lapreparazione del campione, la manipolazione e le tecniche di laboratorio possono inuenzare i risultati.

È responsabilità dell’utente, nel selezionare un qualsiasi metodo di analisi o prodotto, valutare un numero suciente

di campioni con le matrici appropriate e con particolari caratteristiche microbiche per soddisfare i criteri relativi alla

metodologia di test scelta dall’utente.

L’utente ha inoltre la responsabilità di determinare che tutti i metodi di analisi utilizzati e i risultati ottenuti soddisno i

requisiti dei propri clienti ofornitori.

(Italiano)

2

IT

Come per qualsiasi metodo di analisi, i risultati ottenuti grazie all’uso di prodotti di 3M Sicurezza alimentare non

costituiscono una garanzia della qualità delle matrici o dei processi sottoposti a prova.

Limitazione di Garanzia/Rimedio Limitato

SALVO NEI CASI ESPRESSAMENTE INDICATI IN UNA SEZIONE DI GARANZIA LIMITATA DELLA SINGOLA

CONFEZIONE DEL PRODOTTO, 3M NON RICONOSCE ALCUNA GARANZIA ESPLICITA O IMPLICITA, INCLUSE,

MA NON A ESSE LIMITATE, LE EVENTUALI GARANZIE DI COMMERCIABILITÀ O DI IDONEITÀ A UNO SCOPO

PARTICOLARE. Qualora un prodotto 3M Sicurezza alimentare sia difettoso, 3M o il suo distributore autorizzato

provvederanno, a loro discrezione, alla sostituzione o al rimborso del prezzo d’acquisto del prodotto. Questi sono gli unici

rimedi a disposizione del cliente. Si dovrà avvisare immediatamente 3M entro sessanta giorni dal riscontro di eventuali

difetti sospetti nel prodotto, provvedendo a rispedirlo a 3M. Chiamare il servizio clienti (negli USA: 1-800-328-1671) o

rivolgersi al rappresentante autorizzato dei prodotti Sicurezza alimentare 3M per ottenere l’autorizzazione alla restituzione

del prodotto.

Limitazione di Responsabilitá da Parte di 3M

3M NON SARÀ RESPONSABILE DI PERDITE O DANNI, DIRETTI, INDIRETTI, SPECIALI, INCIDENTALI O CONSEGUENTI,

INCLUSA, MA NON IN VIA LIMITATIVA, LA PERDITA DI PROFITTO. In nessun caso la responsabilità legale di 3M andrà

oltre il prezzo d’acquisto del prodotto presunto difettoso.

Conservazione

Conservare le buste contenenti le Piastre 3M Petrilm EC chiuse in frigorifero o nel congelatore a temperatura inferiore

o pari a 8 °C (46 °F). Prima di aprire le buste attendere che esse abbiano raggiunto la temperatura ambiente. Riporre

le Piastre 3M Petrilm EC inutilizzate nella busta originale. Sigillare ripiegando l'estremità della busta e applicando del

nastro adesivo. Non refrigerare le buste aperte per evitarne l'esposizione all’umidità. Le buste aperte e risigillate vanno

conservate in un luogo fresco e asciutto per non oltre quattro settimane. Si raccomanda di conservare le buste di Piastre

3M Petrilm EC risigillate in un congelatore (vedere sotto) se la temperatura del laboratorio supera i 25 °C (77 °F) e/o il

laboratorio si trova in un'area dove l'umidità relativa supera il 50% (con l'eccezione di locali dotati di aria condizionata).

Per conservare le buste aperte in un congelatore, inserire le Piastre 3M Petrilm EC in un contenitore sigillabile.

Per l'utilizzo delle Piastre 3M Petrilm EC congelate aprire il contenitore, togliere le piastre necessarie e rimettere

immediatamente le rimanenti nel contenitore sigillato e quindi nel congelatore. Non utilizzare le Piastre 3M Petrilm

EC dopo la data di scadenza. Il congelatore utilizzato per conservare le buste aperte non deve disporre di un ciclo di

scongelamento automatico, poiché ciò esporrebbe ripetutamente le piastre a livelli di umidità che possono danneggiarle.

Non utilizzare le Piastre 3M Petrilm EC in presenza di segni di scolorimento. Data di scadenza e numero di lotto sono

riportati su ogni confezione di Piastre 3M Petrilm EC. Il numero di lotto è riportato anche sulle singole Piastre 3M

Petrilm EC.

Smaltimento

Dopo l’uso, le Piastre 3M Petrilm EC possono contenere microrganismi che possono rappresentare un potenziale

rischio biologico. Seguire le normative vigenti del settore per lo smaltimento.

Istruzioni per L’uso

Preparazione del campione

1. Usare i diluenti sterili appropriati:

acqua di diluizione con tampone fosfato di Buttereld

4

, 0,1% acqua peptonata, diluente peptone salino, soluzione di

Ringer con un quarto di intensità, soluzione salina (0,85-0,90%), brodo letheen senza bisolti o acqua distillata.

Non utilizzare diluenti contenenti citrato, bisolto o tiosolfato con le Piastre 3M Petrilm EC: possono inibire la

crescita. Se nella procedura standard viene indicato il tampone citrato, sostituire con uno dei tamponi elencati sopra,

riscaldato a 40-45°C.

2. Miscelare o omogeneizzare il campione.

3. Per una crescita ottimale e una ripresa della vitalità dei microrganismi, regolare il pH della sospensione del campione

tra 6,6 e 7,2. Con i prodotti acidi, regolare il pH con 1N NaOH. Con i prodotti alcalini, regolare il pH con 1N HCI.

Piastratura

1. Posizionare la Piastra 3M Petrilm EC su una supercie piana e livellata.

2. Sollevare la pellicola superiore e con la pipetta perpendicolare all'area di inoculazione erogare 1 ml di sospensione

del campione sul centro della pellicola inferiore.

3. Srotolare la pellicola superiore sul campione per evitare di intrappolare eventuali bolle d’aria.

4. Collocare il Diusore per Piastre 3M™ Petrilm™ con il lato piatto rivolto verso il basso al centro della piastra.

Distribuire uniformemente il campione esercitando una leggera pressione al centro del Diusore per piastre 3M

Petrilm. Distribuire l'inoculo sull'intera area di crescita della Piastra 3M Petrilm EC prima che si formi il gel. Non far

scorrere il Diusore per piastre 3M Petrilm sulla pellicola.

(Italiano)

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IT

5. Rimuovere il Diusore per Piastre 3M Petrilm e lasciare riposare la Piastra 3M Petrilm EC per almeno un minuto in

modo da consentire la formazione del gel.

Incubazione

Incubare le Piastre 3M Petrilm EC in posizione orizzontale, con il lato trasparente rivolto verso l'alto in pile di non oltre

20 piastre. È possibile utilizzare tempi e temperature di incubazione diversi a seconda dei metodi di riferimento locali;

alcuni esempi sono riportati nel paragrafo “Istruzioni speciche per metodi validati”.

Interpretazione

1. Le Piastre 3M Petrilm EC possono essere sottoposte a conteggio mediante un conta colonie standard o un'altra

sorgente di luce ingrandita. Le colonie sulla barriera schiumosa non vanno prese in considerazione a causa della loro

rimozione dall’inuenza selettiva del terreno di coltura. Non contare le bolle artefatte che potrebbero essere presenti.

L'interpretazione delle colonie di E. coli sulla Piastra 3M Petrilm EC è la seguente:

AOAC Ocial Methods (998.08 e 991.14) – considerare le colonie con colorazione dal blu al rosso-blu associate al

gas intrappolato, indipendentemente dalla grandezza o intensità di colore, come E. coli confermata. Le colonie blu

senza gas non vengono conteggiate come E.coli.

Altre colonie di coliformi sono rosse e strettamente associate (entro il diametro della colonia stessa) al gas

intrappolato. Le colonie non associate al gas (la distanza tra la colonia e la bolla di gas in tal caso deve essere

maggiore del diametro della colonia) non vengono conteggiate come coliformi. Nella conta totale dei coliformi

rientrano sia le colonie rosse sia quelle blu associate al gas dopo le 24 ore. Ogni volta che, entro il periodo di

incubazione del metodo validato, compare una colonia blu associata al gas questa viene confermata come E. coli.

W AVVERTENZA

Non utilizzare la piastra per il rilevamento di E. coli O157. Poiché la maggior parte dei ceppi di E. coli O157 sono

atipici, essi sono glucuronidasi negativi, non produrranno una colorazione blu e non saranno interpretati come E. coli

sulle Piastre 3M Petrilm EC.

2. L'area della supercie di crescita circolare è pari a circa 20 cm

2

. È possibile stimare i conteggi su piastre contenenti

più di 150 colonie contando il numero di colonie presenti in uno o più quadratini rappresentativi e determinando il

numero medio per quadratino. Moltiplicare il numero medio per 20 al ne di determinare la conta stimata per piastra.

3. Se presenti in grande numero, le Piastre 3M Petrilm EC possono avere una o più delle seguenti caratteristiche:

un'intensicazione del colore del gel con tante piccole colonie indistinte; e numerose bolle di gas. Alte

concentrazioni di E. coli faranno diventare l'area di crescita blu, mentre alte concentrazioni di coliformi (non E. coli)

la faranno diventare rosso scuro. Quando ciò avviene, registrare il risultato come TNTC (Too Numerous To Count,

troppo numerose per essere contate). Se occorre una conta eettiva, la diluizione dovrà essere maggiore.

4. Se necessario, le colonie possono essere isolate per un'ulteriore identicazione. Sollevare la pellicola superiore

adottando tecniche di analisi appropriate e prelevare la colonia dal gel. Analizzare la colonia mediante le procedure

standard.

5. Se non è possibile eseguire il conteggio entro 1 ora dalla rimozione dall'incubatore, le piastre possono essere

congelate e conservate per il conteggio dierito in un contenitore sigillabile a temperatura pari o inferiore a -15 °C

per massimo una settimana.

Per ulteriori informazioni, fare riferimento alla “Guida all'interpretazione della Piastra 3M™ Petrilm™ per il conteggio di

E. coli/Coliformi”. Per qualsiasi domanda su applicazioni o procedure speciche, visitare il nostro sito Web all'indirizzo

www.3M.com/foodsafety o contattare il distributore o il rappresentante 3M di zona.

Istruzioni speciche per metodi validati

AOAC® Ocial Methods

SM

(998.08 Conteggi di Escherichia coli confermati in carne di pollo, carni rosse e pesce,

metodo con lm secco reidratabile)

Incubare le Piastre 3M Petrilm EC per 24 ore ± 2 ore a 35 °C ± 1 °C.

AOAC® Ocial Methods

SM

(991.14 Conteggi di coliformi ed Escherichia coli confermati negli alimenti, metodo con lm

secco reidratabile)

In presenza di coliformi, incubare le Piastre 3M Petrilm EC per 24 ore ± 2 ore a 35 °C ± 1 °C.

In presenza di E. coli incubare le Piastre 3M Petrilm EC per altre 24 ore ± 2 ore (48 ore ± 4 ore totali) a 35 ºC ± 1 ºC.

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