Roche uPath IVD Manuale utente

Tipo
Manuale utente
Guida all’algoritmo di analisi delle
immagini della mammella uPath HER2
(4B5)
Sommario
Introduzione 1
Riepilogo e spiegazione dell’algoritmo 2
Uso previsto 3
Uso previsto del prodotto 3
Obiettivo della guida all’algoritmo 3
Significatività clinica 4
Principi del test 5
Limitazioni 6
Caratteristiche di rete 7
Sicurezza dei dati 8
Flusso di lavoro per l’uso dellalgoritmo uPath HER2 (4B5) 9
Flusso di lavoro del patologo 11
Caratteristiche della colorazione 18
Valutazione dell’anticorpo VENTANA anti-HER2/neu (4B5) 18
Valutazione della colorazione con l’algoritmo uPath HER2 (4B5) 18
Caratteristiche prestazionali 30
Confronto metodologico 30
Studi di riproducibilità del patologo 31
Studi di riproducibilità dello scanner 32
Risoluzione dei problemi 33
Bibliografia 37
Introduzione
Roche uPath enterprise software (uPath enterprise software)
con lalgoritmo di analisi delle immagini della mammella uPath
HER2 (4B5) (algoritmo uPath HER2 (4B5)) è un sistema software
progettato come ausilio per la valutazione semi-quantitativa
dellespressione della proteina nota come recettore del fattore di
crescita dell’epidermide umano 2 (HER2) in sezioni istologiche
colorate mediante immunoistochimica preparate da tessuti normali
e neoplastici fissati in formalina e inclusi in paraffina (FFPE).
uPath enterprise software è una soluzione software end-to-end
per patologia digitale che permette ai laboratori di patologia
di acquisire, gestire, visualizzare, analizzare, condividere ed
elaborare report su immagini digitali di campioni di anatomia
patologica. Utilizzando uPath enterprise software, il patologo
può visualizzare immagini digitali a vari ingrandimenti,
aggiungere annotazioni, effettuare misurazioni su sezioni di
tessuto, eseguire l’analisi delle immagini e generare report.
Nota: l’algoritmo di analisi delle immagini della mammella uPath
HER2 (4B5) è una metodologia computerizzata aggiuntiva,
concepita come ausilio per l’acquisizione e la misurazione
di immagini da vetrini di vetro per microscopio preparati
con campioni di tessuto mammario sottoposti a colorazione
immunoistochimica per determinare la presenza della proteina
HER2. Per assicurare la validità dei punteggi ottenuti mediante
l’analisi delle immagini, è responsabilità del patologo verificare la
concordanza e utilizzare controlli appropriati come specificato
nella scheda metodologica dell’anticorpo VENTANA anti-HER2/
neu (4B5) (disponibile sul sito dialog.roche.com).
1 Guida allalgoritmo di analisi delle immagini della mammella uPath HER2 (4B5)
Riepilogo e spiegazione dell’algoritmo
Per le applicazioni di analisi delle immagini, il patologo utilizza
uPath enterprise software per selezionare e tracciare il
contorno di una o più regioni di interesse (ROI); ciascuna ROI
può essere visualizzata a vari ingrandimenti e poi analizzata
mediante l’algoritmo uPath HER2 (4B5). Viene quindi generato
un conteggio del numero totale di cellule tumorali bersaglio e
le cellule tumorali vengono stratificate in base alla colorazione
o all’assenza di colorazione. Le cellule colorate vengono
stratificate in base all’intensità della colorazione e alla
completezza della colorazione della membrana. Lalgoritmo
uPath HER2 (4B5) combina la percentuale di cellule colorate
(colorate, non colorate), l’intensità della colorazione (debole,
media, forte) e la completezza della colorazione (non colorata,
parziale, completa) per generare un punteggio relativo a HER2 su
una scala da 0 a 3+. Lalgoritmo uPath HER2 (4B5) può generare
un punteggio per una specifica ROI oppure un punteggio
aggregato per tutte le ROI selezionate su un determinato vetrino.
Il patologo può accettare il punteggio assegnato dall’algoritmo
uPath HER2 (4B5) oppure sovrascrivere tale punteggio
assegnandone uno diverso. Lalgoritmo uPath HER2 (4B5) non
esegue interpretazioni indipendenti dei dati e pertanto deve
essere utilizzato unicamente da un patologo qualificato in
combinazione con l’esame istologico, le informazioni cliniche
pertinenti e i controlli appropriati. Lalgoritmo uPath HER2
(4B5) è progettato e indicato come ausilio per il patologo per la
valutazione dellespressione della proteina HER2 in campioni di
tessuto mammario colorati con l’anticorpo VENTANA anti-HER2/
neu (4B5).
2 Guida allalgoritmo di analisi delle immagini della mammella uPath HER2 (4B5)
Uso previsto del prodotto
Lalgoritmo di analisi delle immagini della mammella uPath
HER2 (4B5) è destinato alluso come ausilio per il patologo per
la rilevazione semi-quantitativa della proteina HER2 in tessuto
mammario neoplastico fissato in formalina e incluso in paraffina.
Quando è utilizzato con VENTANA anti-HER2/neu (4B5) Rabbit
Monoclonal Primary Antibody (anticorpo VENTANA anti-HER2/
neu (4B5)) è indicato per l’uso come ausilio per la valutazione
di pazienti con carcinoma mammario per i quali vengono presi
in considerazione i trattamenti con Herceptin
®
(trastuzumab),
KADCYLA
®
(ado-trastuzumab emtansine) o PERJETA
®
(pertuzumab).
Nota: l’algoritmo di analisi delle immagini della mammella uPath
HER2 (4B5) è una metodologia computerizzata aggiuntiva,
concepita come ausilio per l’acquisizione e la misurazione di
immagini da vetrini di vetro per microscopio preparati con campioni
di tessuto mammario sottoposti a colorazione immunoistochimica
per determinare la presenza della proteina HER2. Per assicurare
la validità dei punteggi ottenuti mediante l’analisi delle immagini, è
responsabilità del patologo verificare la concordanza e utilizzare
controlli appropriati come specificato nella scheda metodologica
dell’anticorpo VENTANA anti-HER2/neu (4B5).
Questo algoritmo è indicato per uso diagnostico in vitro (IVD).
Uso previsto
Obiettivo della guida all’algoritmo
La presente guida all’algoritmo uPath HER2 (4B5) (guida
all’algoritmo) ha come obiettivi:
Fornire informazioni di base sull’uso previsto dell’algoritmo
uPath HER2 (4B5), sui principi del test e sulle sue limitazioni.
Definire i materiali necessari e i requisiti informatici, di sicurezza
dei dati e di rete.
Fornire istruzioni passo-passo per l’esecuzione dell’algoritmo
uPath HER2 (4B5).
Presentare immagini fotografiche che illustrano come deve
essere utilizzato lalgoritmo uPath HER2 (4B5).
Offrire uno strumento che faciliti l’uso dellalgoritmo uPath
HER2 (4B5) su sezioni di tessuto mammario FFPE colorate con
l’anticorpo VENTANA anti-HER2/neu (4B5).
Mostrare immagini esemplificative relative a casi di difficile
interpretazione per fornire orientamenti su come utilizzare
l’algoritmo uPath HER2 (4B5) per la loro valutazione.
Presentare le caratteristiche prestazionali dell’algoritmo uPath
HER2 (4B5).
3 Guida allalgoritmo di analisi delle immagini della mammella uPath HER2 (4B5)
Significatività clinica
Il carcinoma mammario è il carcinoma più comune nelle donne
e la seconda causa principale di decessi correlati al cancro.
1,2
In America del Nord la probabilità che una donna sviluppi il
carcinoma mammario è pari a una su otto.
1
Rilevazione precoce
e terapie adeguate possono incidere in misura significativa sulla
sopravvivenza globale.
3,4
Piccoli campioni di tessuto possono
essere facilmente utilizzati nell’immunoistochimica (IHC) di
routine, rendendo questa tecnica, in abbinamento agli anticorpi
che rilevano gli antigeni importanti per l’interpretazione del
carcinoma, uno strumento efficace per il patologo nella diagnosi
e prognosi della malattia. Attualmente l’oncoproteina HER2 è
un importante indicatore del carcinoma mammario.
5,6,7,8
È stato
dimostrato che i farmaci terapeutici Herceptin (trastuzumab),
KADCYLA (ado-trastuzumab emtansine) e PERJETA
(pertuzumab) apportano benefici ad alcuni pazienti affetti da
carcinoma mammario arrestando e in alcuni casi invertendo la
crescita tumorale.
5,6,7,8,9
Tali farmaci sono anticorpi monoclonali
umanizzati che si legano alla proteina HER2 sulle cellule
tumorali.
5,8,9,10
Le analisi diagnostiche in vitro mirate alla valutazione dello
stato HER2 nei pazienti affetti da carcinoma mammario sono
importanti come ausilio per il medico nella determinazione
della terapia HER2-mirata.
5,6,7,8
Lanticorpo VENTANA anti-
HER2/neu (4B5) è destinato alluso nella rilevazione basata
su IHC dell’espressione della proteina HER2 nel carcinoma
mammario. Lalgoritmo uPath HER2 (4B5) funge da complemento
all’anticorpo VENTANA anti-HER2/neu (4B5) per agevolare la
valutazione dei pazienti affetti da carcinoma mammario per i
quali viene preso in considerazione il trattamento con Herceptin
(trastuzumab), KADCYLA (ado-trastuzumab emtansine) o
PERJETA (pertuzumab).
4 Guida allalgoritmo di analisi delle immagini della mammella uPath HER2 (4B5)
Principi del test
Criteri relativi all’intensità e al pattern della colorazione
della membrana cellulare per il punteggio assegnato
dall’algoritmo uPath HER2 (4B5):
Pattern di colorazione Punteggio Valutazione
colorazione
HER2
Nessuna colorazione osservata a
livello della membrana
0 Negativa
Fievole colorazione parziale della
membrana rilevata in una qualsiasi
percentuale delle cellule tumorali
1+ Negativa
Colorazione completa da debole a
moderata della membrana rilevata
in una percentuale >10% delle
cellule tumorali
2+ Equivoca*
Colorazione completa intensa
della membrana rilevata in una
percentuale >10% delle cellule
tumorali
3+ Positiva
* Si consiglia il reflex test tramite ISH
uPath enterprise software con l’algoritmo uPath HER2 (4B5)
impiega tecniche di analisi delle immagini per ottenere un
punteggio relativo a HER2.
Lalgoritmo uPath HER2 (4B5) utilizza parametri predefiniti per
assegnare un punteggio alle immagini di tessuto colorato con
l’anticorpo VENTANA anti-HER2/neu (4B5).
Fasi dell’analisi delle immagini:
Rilevamento delle cellule nell’intera immagine.
Classificazione delle cellule come cellule tumorali o cellule di
altro tipo.
Identificazione della membrana colorata e stratificazione della
membrana in categorie: colorazione parziale o completa e
colorazione di intensità debole, media o forte.
Calcolo del punteggio HER2 mediante la combinazione della
classificazione delle cellule, dell’intensità della colorazione e
della classificazione della membrana.
Modalità di identificazione delle cellule tumorali da
parte dell’algoritmo di analisi delle immagini per HER2 e
modalità di calcolo del punteggio:
Lalgoritmo uPath HER2 (4B5) identifica le cellule tumorali
valutando colore, intensità, dimensioni e caratteristiche
morfologiche.
Le cellule tumorali identificate vengono classificate come
colorate in base al rilevamento della membrana e a soglie
preimpostate.
Per calcolare il punteggio HER2, l’algoritmo uPath HER2 (4B5)
utilizza le cellule colorate identificate e le stratifica in base
all’intensità e alla completezza della colorazione.
5 Guida allalgoritmo di analisi delle immagini della mammella uPath HER2 (4B5)
Lalgoritmo uPath HER2 (4B5) è progettato per funzionare con
l’anticorpo VENTANA anti-HER2/neu (4B5). La correttezza dei
risultati del test dipende dalla qualità e dall’accuratezza del
vetrino IHC di cui viene acquisita l’immagine e dell’immagine
acquisita che viene quindi analizzata.
Il patologo deve convalidare la corsa di colorazione con
l’anticorpo VENTANA anti-HER2/neu (4B5) mediante esame
manuale al microscopio dei vetrini di controllo per HER2 al fine
di verificare che siano stati ottenuti i risultati attesi prima di
procedere allaccettazione delle immagini dei vetrini in uPath
enterprise software per analizzarli.
Occorre seguire le indicazioni del produttore relative
all’anticorpo VENTANA anti-HER2/neu (4B5), compreso l’uso di
tutto il materiale per il controllo di qualità positivo e negativo in
ogni corsa di colorazione. Se i vetrini di controllo non vengono
ritenuti accettabili allesame manuale al microscopio, occorre
ripetere la colorazione dei tessuti in modo da ottenere risultati
accettabili.
Il patologo deve seguire le indicazioni per l’interpretazione dei
risultati ottenuti con l’anticorpo VENTANA anti-HER2/neu (4B5).
Lalgoritmo uPath HER2 (4B5) è progettato per essere
utilizzato da un patologo qualificato in combinazione con
l’esame istologico, le informazioni cliniche pertinenti e i
controlli appropriati. Non è destinato alluso come strumento
indipendente e richiede l’intervento di un operatore competente
durante l’intero processo di analisi.
Lalgoritmo uPath HER2 (4B5) può generare punteggi errati
se le immagini acquisite presentano una colorazione anomala
(colorazione nucleare, pigmentazione, ecc.).
Lalgoritmo uPath HER2 (4B5) può escludere i nuclei tumorali che
appaiono allungati, indipendentemente dalla forma complessiva
della cellula. Per tale motivo, potrebbe essere necessario
valutare manualmente i tumori che contengono un elevato
numero di cellule con nuclei tumorali allungati.
Lalgoritmo uPath HER2 (4B5) è stato addestrato, sviluppato e
convalidato su: carcinomi lobulari invasivi, duttali, mucinosi,
midollari, papillari e micropapillari, nonché su alcune lesioni
metastatiche.
Lalgoritmo uPath HER2 (4B5) non è stato testato, né la sua
sicurezza ed efficacia sono state convalidate, quando viene
utilizzato con un personal computer (PC) da casa.
Lalgoritmo uPath HER2 (4B5) identifica membrane colorate con
DAB con qualsiasi livello di intensità e completezza. Lalgoritmo
utilizza una soglia di rumore pari allo 0,5% di tutte le cellule
tumorali per assegnare a un caso il punteggio 1+. Non segue
l’indicazione riportata nella scheda metodologica di utilizzare
una soglia a livello di singola cellula per lassegnazione di un
punteggio 1+. In alcuni casi caratterizzati dalla presenza di un
numero molto ridotto di cellule che presentano colorazione
della membrana, ciò potrebbe determinare l’assegnazione
del punteggio 0 anziché 1+. Questa soglia di rumore è stata
introdotta per garantire che ai casi veri negativi venga assegnato
il punteggio 0.
Lalgoritmo uPath HER2 (4B5) è progettato per essere sensibile
al colore marrone (colorazione DAB) al fine di garantire
che la colorazione della membrana venga rilevata anche
quando è fievole. Per tale motivo, può classificare in maniera
errata campioni di tessuto contenenti artefatti marroni quali
pigmentazione, colorazione di fondo in fibre muscolari o qualsiasi
altro artefatto che appaia di colore marrone. uPath enterprise
software dispone di strumenti che permettono al patologo di
escludere aree di questo tipo. Tali strumenti sono illustrati in
maggior dettaglio nella sezione relativa alle caratteristiche della
colorazione.
Lalgoritmo uPath HER2 (4B5) è progettato per essere sensibile
ai casi 2+. Per questa ragione, lalgoritmo uPath HER2 (4B5)
può assegnare erroneamente il punteggio 2+ a certi casi 1+.
Nello specifico, i casi 1+ per i quali la percentuale di cellule
tumorali a colorazione completa è leggermente inferiore a
10% o i casi con un’alta quantità di colorazione citoplasmatica
delle cellule tumorali possono essere erroneamente valutati
come 2+. In queste particolari tipologie di casi il patologo p
dover sovrascrivere il punteggio. La colorazione citoplasmatica
è discussa in maggior dettaglio nella sezione relativa alle
caratteristiche della colorazione.
Limitazioni
6 Guida allalgoritmo di analisi delle immagini della mammella uPath HER2 (4B5)
7 Guida allalgoritmo di analisi delle immagini della mammella uPath HER2 (4B5)
Caratteristiche di rete
Si consiglia una connessione di rete a 1Gbps tra uPath enterprise software e il sistema di gestione delle immagini (IMS).
Tabella 1. Specifiche del server per lanalisi delle immagini con Roche uPath per laboratori di piccole dimensioni.
Parametro Dettagli
Processore CPU a 3,6GHz
Numero di core 4
RAM 6 x 8GB (48GB)
Hyper-threading Disabilitata
Disco rigido SSD da 240GB
Sistema operativo Microsoft Windows Server 2016
Macchina virtuale (VM)
Ulteriori informazioni sulla VM Le prestazioni saranno diverse da quelle dei server fisici a causa dell’overhead introdotto
dalla VM.
Antivirus Symantec Endpoint Protection versione 12
Alimentazione 110V/220V, 800Watt (2)
Porte 2 USB, adattatore HPE Eth 10/25Gb
Gruppo di continuità Raccomandato
Tabella 2. Specifiche del server per lanalisi delle immagini con Roche uPath per laboratori di dimensioni da medie a grandi.
Parametro Dettagli
Processore CPU a 3,6GHz (2 processori)
Numero di core 8 per processore, 16 in totale
RAM 12 x 8GB (96 GB)
Hyper-threading Disabilitata
Disco rigido SSD da 240GB (2x)
Sistema operativo Microsoft Windows Server 2016
Macchina virtuale (VM)
Ulteriori informazioni sulla VM Le prestazioni saranno diverse da quelle dei server fisici a causa dell’overhead introdotto
dalla VM.
Antivirus Symantec Endpoint Protection versione 12
Alimentazione 110V/220V, 800Watt (2)
Porte 2 USB, adattatore HPE Eth 10/25Gb
Gruppo di continuità Raccomandato
Luso di software dannoso o laccesso non autorizzato allo
strumento possono causare la perdita di dati o l’indisponibilità
dello strumento.
Per evitare l’infezione da parte di software dannoso o
l’accesso non autorizzato e l’uso improprio dello strumento, è
fondamentale seguire le seguenti indicazioni:
Non installare o eseguire nessun altro software sullo strumento.
Assicurarsi che gli altri computer e servizi della rete siano sicuri
e adeguatamente protetti da software dannoso e dall’accesso
non autorizzato. Ciò vale, per esempio, per il sistema di
informazioni di laboratorio (LIS), la condivisione di archiviazione,
il backup o lassistenza.
I clienti sono responsabili della sicurezza della propria rete
locale, in particolare della protezione della rete da software
dannoso e attacchi. Tale protezione potrebbe comprendere
misure, come un firewall, atte a separare il dispositivo da reti non
controllate. Inoltre, potrebbe includere misure che garantiscano
che la rete connessa non contenga codici dannosi.
Limitare laccesso fisico allo strumento e a tutte le infrastrutture
informatiche collegate (computer, cavi, dispositivi di rete e così
via).
Assicurarsi che i file di backup e di archiviazione dello
strumento siano protetti dallaccesso non autorizzato e
da eventuali eventi calamitosi. Ciò include la posizione di
archiviazione remota, siti di ripristino di emergenza e il
trasferimento sicuro dei file di backup.
Se possibile, utilizzare un firewall per limitare il traffico di rete.
Le unità di memoria flash USB possono essere utilizzate per
vari tipi di backup e ripristino. Se usata in maniera impropria,
un’unità di memoria flash USB può causare la perdita di dati o il
malfunzionamento dello strumento.
Utilizzare unicamente unità di memoria flash USB testate e
installate dall’assistenza Roche locale.
È possibile utilizzare un solo dispositivo USB per volta. Prima
di inserire un’unità di memoria flash USB, controllare che non
siano collegati altri dispositivi USB.
Per rimuovere un’unità di memoria flash USB, scegliere il
pulsante di espulsione in Windows.
La configurazione predefinita del sistema operativo (SO)
fornita con il server non deve essere alterata, poiché eventuali
alterazioni avrebbero implicazioni sulle configurazioni di
protezione avanzata del SO.
Sicurezza dei dati
Per evitare che uPath enterprise software possa essere infettato
da virus, utilizzare lunità di memoria flash USB esclusivamente
sullo strumento. Non memorizzare altri dati su questa unità di
memoria flash USB.
8 Guida allalgoritmo di analisi delle immagini della mammella uPath HER2 (4B5)
Flusso di lavoro per l’uso dell’algoritmo uPath HER2 (4B5)
Materiali forniti
Algoritmo uPath HER2 (4B5)
Materiali necessari ma non forniti
uPath enterprise software
Vetrini di tessuto mammario colorati con l’anticorpo VENTANA anti-HER2/neu (4B5) utilizzando ultraView Universal DAB Detection Kit
su uno strumento BenchMark ULTRA.
Scanner per vetrini VENTANA DP 200
Avvertenze e precauzioni
1. Per uso diagnostico in vitro (IVD).
2. Solo per uso professionale.
3. ATTENZIONE: negli Stati Uniti le leggi federali consentono la vendita di questo dispositivo solo da parte di un medico o solo su
prescrizione medica. (Rx Only)
4. Per segnalare gravi incidenti sospetti associati a questo dispositivo, contattare il rappresentante locale Roche e l’autorità competente
dello stato membro o del paese di residenza dell’utente.
Flusso di lavoro
1. Il tessuto mammario preparato su un vetrino di vetro viene colorato con l’anticorpo VENTANA anti-HER2/neu (4B5) utilizzando uno
strumento BenchMark ULTRA.
2. Viene eseguita lacquisizione dell’immagine (scansione dell’intero vetrino) con lo scanner per vetrini VENTANA DP 200 con un
ingrandimento 20x su un piano z.
3. Dopo l’acquisizione delle immagini digitali, queste vengono trasferite dal computer associato allo scanner per vetrini VENTANA DP 200 al
sistema di gestione delle immagini (IMS) su un server centralizzato.
4. In seguito al trasferimento sul server, viene creato un caso in uPath enterprise software. La creazione del caso può avvenire
automaticamente mediante comunicazione con il sistema di informazioni di laboratorio (LIS) utilizzando le informazioni di
identificazione (ovvero tipo di tessuto e anticorpo primario) contenute nell’etichetta barcode del vetrino oppure mediante inserimento
manuale in uPath enterprise software. Fare riferimento alla Guida per l’utente di uPath enterprise software (PN 1018943IT).
5. Se l’algoritmo uPath HER2 (4B5) è installato (deve essere installato su un server distinto da quello di uPath enterprise software e
dell’IMS) e si procede all’accettazione di un’immagine 20x con il tipo di tessuto e di colorazione appropriati, uPath enterprise software
avvia automaticamente lanalisi dell’intero vetrino (WSA).
6. La WSA analizza automaticamente l’intera immagine scansionata.
7. Al termine della WSA, il visualizzatore di uPath enterprise software notifica il patologo con una barra blu che recita “analysis
successful” (analisi riuscita).
8. Il patologo può selezionare ROI specifiche alle quali assegnare un punteggio utilizzando gli strumenti ROI ed Exclusion (Esclusione) in
uPath enterprise software.
9. Il patologo esamina i risultati dellanalisi dell’immagine e può accettare il punteggio o sovrascriverlo manualmente.
Colorazione
La preparazione e la colorazione del tessuto devono seguire le indicazioni fornite nella scheda metodologica dell’anticorpo VENTANA
anti-HER2/neu (4B5).
9 Guida allalgoritmo di analisi delle immagini della mammella uPath HER2 (4B5)
Devono essere esaminati tutti i controlli appropriati e, se la colorazione dei vetrini non rispetta le indicazioni riportate nella scheda
metodologica dell’anticorpo VENTANA anti-HER2/neu (4B5), sarà necessario ripeterla.
Lalgoritmo uPath HER2 (4B5) richiede l’uso dell’anticorpo VENTANA anti-HER2/neu (4B5) e di qualsiasi altro accessorio o materiale
aggiuntivo indicato nella relativa scheda metodologica per la colorazione dei tessuti prima dellanalisi.
Lanticorpo VENTANA anti-HER2/neu (4B5) rileva la proteina HER2 in tessuto mammario FFPE colorato con ultraView Universal DAB
Detection Kit su uno strumento BenchMark ULTRA.
Acquisizione dell’immagine
Per la scansione dei vetrini è necessario uno scanner per vetrini VENTANA DP 200. La scansione delle immagini deve essere eseguita
con un ingrandimento 20x. Si raccomanda di verificare che il tessuto sia privo di pieghe e di aree con presenza di inchiostro. Se ampie
sezioni dell’immagine non sono a fuoco, si raccomanda di ripetere la scansione dei vetrini. Per ulteriori informazioni sulla scansione,
fare riferimento alla Guida per l’utente IVD dello scanner per vetrini VENTANA DP 200 (PN1017149IT).
Navigazione generale: uPath enterprise software
uPath enterprise software è progettato per consentire la personalizzazione di varie funzionali, tra cui la configurazione dei report
e l’interfaccia utente, in base alle esigenze individuali e a quelle del centro. La presente guida allalgoritmo descrive unicamente gli
strumenti necessari per l’uso dell’algoritmo uPath HER2 (4B5). Per ulteriori informazioni su uPath enterprise software fare riferimento
alla Guida per l’utente di uPath enterprise software.
10 Guida allalgoritmo di analisi delle immagini della mammella uPath HER2 (4B5)
Flusso di lavoro del patologo
Apertura di un caso in uPath enterprise software
Per accedere alle immagini di tessuto mammario colorato con l’anticorpo VENTANA anti-HER2/neu (4B5), fare doppio clic su un caso
o selezionare un caso e premere la scheda Viewer (Visualizzatore) (Figura 1).
Verrà visualizzata una schermata con tutte le immagini associate al caso (Figura 2).
Figura 2
Figura 1
11 Guida all’algoritmo di analisi delle immagini della mammella uPath HER2 (4B5)
Una volta che un vetrino colorato con lanticorpo VENTANA anti-HER2/neu (4B5) è stato scansionato su uno scanner per vetrini
VENTANA DP 200 con un ingrandimento 20x, l’immagine viene importata in uPath enterprise software e associata a un caso.
Lalgoritmo uPath HER2 (4B5) avvierà automaticamente la WSA. Il tempo necessario per il completamento della fase di pre-
computazione della WSA dipende dalle specifiche del server, dalle dimensioni dell’immagine e dal numero di immagini in coda. La
visualizzazione del messaggio “waiting to start auto-analysis” (in attesa di iniziare lauto-analisi) indica che le immagini sono in coda
e devono ancora essere analizzate, mentre quando la WSA è in corso viene visualizzato il messaggio “analyzing” (analisi in corso)
(Figura 3 e Figura 4).
Una volta che uPath enterprise software ha completato lanalisi dell’immagine mediante la WSA, in Viewer (Visualizzatore) compare il
messaggio “analysis successful” (analisi riuscita) sotto l’immagine del vetrino (Figura 5). Non è possibile assegnare un punteggio alle
immagini prima che la WSA sia stata completata correttamente.
Figura 5
Figura 4
Figura 3
12 Guida allalgoritmo di analisi delle immagini della mammella uPath HER2 (4B5)
Disegno della/e ROI dell’intero tumore: selezione dell’area tumorale
Utilizzare il pulsante dello strumento Freehand (Mano libera) nel menu a discesa ROI (Figura 6) per selezionare l’area o le aree
tumorali sull’immagine del vetrino IHC da analizzare. La Figura 7 mostra un’immagine in cui è disegnata una singola ROI. È possibile
disegnare altre ROI. Ogni area selezionata determinerà la comparsa di una ROI nel riquadro Slide Panel (Pannello vetrini) (Figura 8).
Figura 7
Figura 8
Figura 6
13 Guida allalgoritmo di analisi delle immagini della mammella uPath HER2 (4B5)
Disegno della/e ROI dell’intero tumore: area di esclusione
Quando si tracciano le ROI potrebbe essere necessario escludere determinate aree; le specifiche aree da evitare od omettere saranno
descritte più avanti, insieme a opportuni esempi, nella sezione relativa alle caratteristiche della colorazione. Utilizzare lo strumento di
esclusione Freehand (Mano libera) nel menu a discesa Exclusion (Esclusione) (Figura 9) per escludere aree specifiche (Figura 10). Se
ampie aree dell’immagine appaiono poco chiare o sfocate, ripetere la scansione del vetrino.
Le aree escluse non saranno analizzate dall’algoritmo uPath HER2 (4B5) e le cellule tumorali colorate e non colorate presenti in tale
area saranno escluse dallarea di analisi totale. Se la ROI è già stata analizzata e si specifica un’esclusione, sarà necessario ripetere
l’analisi della ROI; la sovrimpressione e il punteggio verranno aggiornati di conseguenza.
Tracciare un numero elevato di esclusioni, in particolare aree complicate con lo strumento Freehand (Mano libera), è una procedura
dispendiosa in termini di tempo e può influire sull’efficienza del flusso di lavoro pur avendo un impatto solo marginale sul punteggio
finale. Se un caso richiede un numero elevato di esclusioni, il patologo deve
Tracciare diverse ROI ed escludere le porzioni di tessuto per le quali ritiene che sia impossibile assegnare un punteggio, riducendo al
minimo l’uso dello strumento Exclusion (Esclusione).
Limitare le esclusioni e sovrascrivere manualmente il punteggio con un punteggio diverso.
Disegno della/e ROI dell’intero tumore: eliminazione
Se una ROI dell’intero tumore selezionata non è ottimale, è possibile eliminarla. Selezionare la ROI dell’intero tumore facendo clic al
centro della ROI sull’immagine, quindi fare clic sul pulsante Delete (Elimina) nel riquadro Slide Panel (Pannello vetrini) (Figura 11) o
all’interno dell’immagine del vetrino accanto alla ROI (Figura 12). Verrà visualizzata una finestra di conferma. Selezionare Confirm
(Conferma) per eliminare la ROI selezionata. Selezionare Cancel (Annulla) per annullare l’eliminazione della ROI.
Figura 9
Figura 11
Figura 12
Figura 10
14 Guida allalgoritmo di analisi delle immagini della mammella uPath HER2 (4B5)
Una volta che sono state disegnate tutte le ROI dell’intero tumore e/o le aree di esclusione, l’immagine è pronta per essere analizzata.
Selezionare la ROI dell’intero tumore facendo clic al centro della ROI da analizzare o facendo clic sulla ROI nel riquadro Slide Panel
(Pannello vetrini). Per ciascuna ROI, fare clic sul pulsante Image Analysis (Analisi dell’immagine) nel riquadro Slide Panel (Pannello
vetrini) (Figura 13) o accanto alla ROI (Figura 14).
Una volta che l’analisi di HER2 è stata completata, il risultato viene visualizzato in due zone del riquadro Slide Panel (Pannello vetrini):
sotto Slide Score (Punteggio vetrino) e accanto alle ROI (Figura 15). Lo Slide Score (Punteggio vetrino) è basato su una sommatoria
dello stato di HER2 su tutte le ROI selezionate e corrisponde al punteggio che comparirà nel report.
È anche possibile visualizzare informazioni più dettagliate nella finestra a comparsa Slide Score (Punteggio vetrino) e nella finestra
a comparsa ROI Details (Dettagli ROI) facendo clic sull’icona della finestra a comparsa (Figura 16). Verrà visualizzata la finestra a
comparsa Slide Score (Punteggio vetrino) (Figura 17). Per nascondere queste informazioni, è sufficiente fare nuovamente clic sulla
stessa icona della finestra a comparsa.
Figura 15
Figura 17
Figura 16
Figura 13
Figura 14
15 Guida all’algoritmo di analisi delle immagini della mammella uPath HER2 (4B5)
Analisi delle immagini HER2: colore in sovrimpressione
Una volta premuto il pulsante ROI(s) Analysis (Analisi della/e ROI) e analizzato il tessuto, sulla ROI verrà visualizzato colore in
sovrimpressione. Nell’immagine che segue (Figura 18), il colore rosso in sovrimpressione rappresenta le membrane cellulari
interpretate come colorate positivamente per HER2. Quando si afferra l’immagine (premendo il pulsante sinistro del mouse e
spostando l’immagine), il colore in sovrimpressione scompare (Figura 19). Quando si rilascia il pulsante del mouse, il colore in
sovrimpressione ricompare (Figura 18).
Figura 18
Figura 19
16 Guida allalgoritmo di analisi delle immagini della mammella uPath HER2 (4B5)
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Roche uPath IVD Manuale utente

Tipo
Manuale utente